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单精子注射实验

简要描述:单精子注射实验(ICSI) 是一种显微操作辅助生殖技术,通过物理方式将单个精子直接注入成熟卵母细胞的胞质内,强制完成受精过程。

  • 更新时间:2025-07-17
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详细介绍

一、技术定义与核心原理

单精子注射(ICSI) 是一种显微操作辅助生殖技术,通过物理方式将单个精子直接注入成熟卵母细胞的胞质内,强制完成受精过程。其核心原理包括:

  1. 绕过自然受精屏障

    • 规避精子获能、顶体反应及卵膜穿透等自然步骤,直接解决精子活力低下、形态异常或卵母细胞膜穿透障碍等问题。

  2. 精卵强制融合

    • 通过显wei针机械刺激卵母细胞,激活钙振荡信号通路,启动胚胎发育。

  3. 遗传物质高效利用

    • 单精子即可完成受精,显著节省珍贵遗传资源(如濒危物种精液、死亡个体冷冻样本)。

生物学意义:ICSI不仅是受精失败(如多精入卵、精子无能)的补救方案,更是研究受精机制与胚胎发育的关键实验模型


二、标准化操作流程(以马为例)

1. 卵母细胞采集与成熟

步骤技术要点成功率
活体卵巢穿刺(OPU)超声引导经阴道穿刺卵泡,吸取卵丘-卵母复合体(COCs)60–70%获卵率
体外成熟培养(IVM)未成熟卵子在含激素(FSH/LH)培养基中培养24–36小时至MII期50–60%成熟率

2. 精子处理与注射

  • 精子来源:新鲜精液、冷冻复苏精液、附睾穿刺精子甚至死精(需化学激活)。

  • 注射关键操作

    • 精子制动:显微zhen机械损伤尾部,增强受精能力。

    • 显微注射:固定卵子→穿刺透明带→注入精子(需<0.5 pL胞质抽吸验证)。

       

3. 胚胎培养与移植

  • 体外培养:受精卵在KSOM/SOF培养基中培养至囊胚(约7–10天)。

  • 移植策略

    • 手术移植:早期胚胎植入受体输卵管(高妊娠率但侵入性强)。

    • 非手术移植:囊胚期经宫颈植入子宫(主流趋势)。


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